Gewebespezifischer Plasminogen Aktivator (t-PA)

t-PA ist ein Plasminogen Aktivator der als einkettiges Molekül synthetisiert und sekretiert wird, mit einem Molekulargewicht von 70 kDa. Einkettiger t-PA wird nach Spaltung durch Plasmin an der Peptidbindung Arg278 – Ile279 in die zweikettige Form überführt. Das entstandene zweikettige Molekül besteht aus   einer leichten Kette (B-Kette), die die katalytische Triade Ser, His, Arg enthält und aus einer schweren Kette (A-Kette), die zwei Kringle Domänen, eine EGF Domäne und eine Fibronectin Finger Domäne enthält.

Die Fibrinspezifität des t-PA wird durch die Bindung über die Finger- und/oder Kringle-2 Domäne vermittelt, wobei in letzterem Fall die Lysin-Bindungsstellen beteiligt sind.

Die Plasminogen-Aktivierung durch t-PA ist in besonderer Weise Fibrin-spezifisch. In Abwesenheit von Fibrin sind beide t-PA Formen, ein- und zweikettige, schlechte Aktivatoren für Glu-Plasminogen, bedingt durch einen relativ hohen K_m Wert und einen niedrigen K_cat Wert. Obwohl beide t-PA Formen unter physiologischen Bedingungen ähnliche Plasminogen Aktivierungseigenschaften besitzen, ist zweikettiger t-PA in Testsystemen, die entweder niedermolekulare p-nitro Anilide oder Glu-Plasminogen als Substrat verwenden, aktiver als einkettiger t-PA. Beide t-PA Formen unterscheiden sich auch in der Geschwindigkeit mit der sie durch physiologische Inhibitoren gehemmt werden: Zweikettiger t-PA wird durch PAI-2 wesentlich schneller inaktiviert als einkettiger t-PA.

t-PA zirkuliert in einer Konzentration von etwa 5 ng/ml in Plasma. Jedoch sind 95% des zirkulierenden t-PA mit PAI-1 komplexiert und weniger als 5% zirkuliert in der freien Form. In der Folge von venösen Verschlüssen erhöht sich die Konzentration des t-PA Antigens auf 10 ng/ml oder höher, und führt damit zu meßbarer fibrinolytischer Aktivität. Dies ist vermutlich die Konsequenz aus der Kombination einer   erhöhten t-PA Freisetzung aus Endothelzellen mit einer reduzierten t-PA Entfernung aus der Verschlußstelle.

Cadaver vessel perfusate plasminogen activator purified according to the method of Binder et al. (B.R. Binder, J.Spragg, K.F. Austen: Purification and characterization of human vascular plasminogen activator derived from blood vessel perfusates. J. Biol. Chem. 1998-2003, 1979).